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在應(yīng)用ELISA時(shí)，首先要清楚下面內(nèi)容：我們測(cè)定ELISA試劑盒到底是檢測(cè)抗體還是抗原？根據(jù)天津睿創(chuàng)實(shí)驗(yàn)過程分析，對(duì)這兩種抗體，抗原分別作了測(cè)試，大家可以根據(jù)我們給出的結(jié)果做個(gè)對(duì)別，從而分辨出ELISA試劑盒到底是檢測(cè)抗體還是抗原？1.檢測(cè)抗原常用于檢測(cè)抗原的方法是非競(jìng)爭(zhēng)性的雙抗體夾心法，其次是競(jìng)爭(zhēng)法。但競(jìng)爭(zhēng)法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難，特別是檢測(cè)微生物的抗原，因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原，這對(duì)于某些抗原是很難做到的，甚至是不可能的。另外在競(jìng)爭(zhēng)法中，酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起，許多標(biāo)本中...

內(nèi)源性干擾因素，包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等。一、類風(fēng)濕因子在類風(fēng)濕患者及正常人血清中，常含有較高或不同濃度的類風(fēng)濕因子(RF)，其一般為IgM型，亦有IgG和IgA型，具有與變性IgG產(chǎn)生非特異結(jié)合的特點(diǎn)，因?yàn)樵贓LISA測(cè)定中，其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨后加入的酶標(biāo)的特異抗體IgG結(jié)合，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。避免其發(fā)生的方法有：1.用F(ab)2替代完整的IgG。2.標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理。3.檢測(cè)抗...

依賴核酸序列的擴(kuò)增技術(shù)（NASBA)是在PCR基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新技術(shù)，是由1對(duì)帶有T7啟動(dòng)子序列的引物引導(dǎo)的連續(xù)、等溫、基于酶反應(yīng)的核酸擴(kuò)增技術(shù)，反應(yīng)在41℃進(jìn)行，可以在2h左右將模板RNA擴(kuò)增約109倍，比常規(guī)PCR法高1000倍，不需特殊的儀器。該技術(shù)一出現(xiàn)就被用于疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測(cè)。盡管RNA的擴(kuò)增也可以使用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)(通過反轉(zhuǎn)錄形成單鏈DNA模板)，NASBA相比則有自己的優(yōu)勢(shì)：可以在相對(duì)恒溫的條件下進(jìn)行（一般恒溫為41℃）。該技...

elisa試劑盒根據(jù)其應(yīng)用和設(shè)計(jì)可以分為以下幾類：一、直接elisa試劑盒：*特征：使用標(biāo)記有酶的抗體直接與樣本中的抗原結(jié)合，無需二抗。*優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，反應(yīng)時(shí)間短。*缺點(diǎn)：可能存在抗體與抗原結(jié)合位點(diǎn)的競(jìng)爭(zhēng)，影響靈敏度。二、間接elisa試劑盒：*特征：使用未標(biāo)記的抗體捕獲樣本中的抗原，然后使用標(biāo)記有酶的二抗進(jìn)行檢測(cè)。*優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，可以通過使用不同的二抗來放大信號(hào)。*缺點(diǎn)：操作步驟較多，可能增加背景噪音。三、夾心elisa試劑盒（三明治ELISA）：*特征：使用兩種抗體，...

在人細(xì)胞ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，我們或多或少會(huì)遇到樣本濃度接近試劑盒靈敏度，樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象，尤其是血清和血漿樣本，這可能是基質(zhì)效應(yīng)的結(jié)果。那么什么是基質(zhì)效應(yīng)呢？基質(zhì)是指除目標(biāo)分析物之外的樣品部分。因?yàn)榛|(zhì)成分會(huì)顯著干擾分析過程，影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。這些效應(yīng)在業(yè)內(nèi)統(tǒng)稱為矩陣效應(yīng)。這是人細(xì)胞ELISA試劑盒研發(fā)和使用中需要避免的雷。當(dāng)單個(gè)樣品或少量樣品的數(shù)值低于空白值時(shí)，可能是實(shí)驗(yàn)操作中出現(xiàn)了問題。這時(shí)候就要增加重復(fù)，提高操作技術(shù)。當(dāng)許多樣品低于空白值時(shí)，應(yīng)考...

熒光定量PCR的應(yīng)用領(lǐng)域：1、核酸定量分析:對(duì)傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測(cè),比如近期流行的甲型H1N1流感，轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物基因拷貝數(shù)的檢測(cè)，RNAi基因失活率的檢測(cè)等。2、基因表達(dá)差異分析:比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等)，特定基因在不同時(shí)相的表達(dá)差異以及cDNA芯片或差顯結(jié)果的確證3、SNP檢測(cè):檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性對(duì)于研究個(gè)體對(duì)不同疾病的易感性或者個(gè)體對(duì)特定藥物的不同反應(yīng)有著重要的意義，因分子信標(biāo)結(jié)構(gòu)的巧...