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2023.11.18新版:ELISA實驗的原理總結-睿創生物
2023-12-19
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以下是2023.11.18新版:ELISA實驗的原理總結:ELISA即酶聯免疫吸附測定,是一類常用的免疫酶技術。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,然后利用酶標記(偶聯)的抗體或抗原與之孵育,加入顯色劑顯色,通過酶標儀測定待測物顏色與標準物顏色的差異,繪制出酶活曲線得出待測物濃度。一、四種常見ELISA方法:1.直接ELISA將抗原固定于ELISA板上,然后用酶標抗體直檢測抗原。相較于其它類型的ELISA實驗,直接ELISA實驗步驟少,檢測速度快,不需要用到二抗,...
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人白細胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒的原理和操作方法-睿創生物
2023-12-18
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人白細胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒的原理和操作方法檢測原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白細胞介素10(IL-10)水平。用純化的人白細胞介素10(IL-10)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入人白細胞介素10(IL-10),再與HRP標記的人白細胞介素10(IL-10)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的...
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ELISA實驗各種樣本收集及處理方法
2023-12-15
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ELISA實驗各種樣本收集及處理方法:由于ELISA實驗只能檢測可溶性蛋白質的含量,因此要求樣本應清晰透明并離心除去沉淀物或懸浮物質。為確保實驗的準確性,-20℃或-80℃保存的樣本應在1-6個月內完成檢測,4℃保存的樣本在一周內完成檢測。此外,樣本中不能含有會抑制HRP活性的NaN3,否則會造成假陰性結果。可用于ELISA實驗的樣本一般有血清、血漿、尿液、細胞培養上清以及組織勻漿等。不同樣本類型的預處理方法也不同。適當的樣本預處理是確保ELISA實驗正確性和準確性的第一步。...
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什么是原代細胞
2023-12-15
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什么是原代細胞原代細胞(primaryculturecell)是指從機體取出后立即培養的細胞。動物組織經胰蛋白酶等消化、分散,獲得單個細胞,再生長于培養皿中。大多數組織可以制備原代細胞,但生長的快慢及難易程度不一。腎和睪丸常用,甲狀腺細胞生長較慢,只用于某些特定的病毒如豬傳染性腸胃炎病毒的培養。組織塊培養法1、組織塊接種后的前3天,在觀察和移動的過程中,注意不要引起液體的振蕩。為保證組織塊附著于瓶壁上,要避免頻繁晃動。2、加入的培養液不宜過多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫...
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小鼠ELISA試劑盒標本的采取與保存
2023-11-28
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大部分小鼠ELISA試劑盒檢測均以血清為標本。1.血清標本可按常規方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的小鼠ELISA試劑盒測定中,如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。2.一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG聚合,使間接法的試劑本底加深。3.超過一周測定的需-20℃保存。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻并避免產生氣泡。4.混濁或有沉淀...
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ELISA實驗操作要點樣本的技巧
2023-11-28
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收集整理三類樣本的技巧:由于ELISA實驗只能檢測可溶性蛋白質的含量,因此要求樣本應清晰透明并離心除去沉淀物或懸浮物質。為確保實驗的準確性,-20℃或-80℃保存的樣本應在1-6個月內完成檢測,4℃保存的樣本在一周內完成檢測。此外,樣本中不能含有會抑制HRP活性的NaN3,否則會造成假陰性結果。可用于ELISA實驗的樣本一般有血清、血漿、尿液、細胞培養上清以及組織勻漿等。不同樣本類型的預處理方法也不同。適當的樣本預處理是確保ELISA實驗正確性和準確性的第一步。這里,我們將介...